紫外可见分光光度计测得门冬酰胺酶活力含量过程方法 

酶活力对照品溶液的制备取经105T：

干燥至恒重的硫酸铵适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制

成0. 0015mol/L的溶液。

供试品溶液的制备取本品约O . lg ,精密称定，加磷酸

盐缓冲液（取0. lm o l/L磷酸氢二钠溶液适量，用0. lmol/L

磷酸二氢钠溶液调节p H 值至8.0)溶解并定量稀释制成每

lm l中约含5 单位的溶液。

测定法取试管3 支（14Cm X l . 2cm),各加人用上述磷

酸盐缓冲液配制的0. 33%门冬酰胺溶液1.9ml,于371C水浴

中预热3分钟，分别于*管U ) 中加人25% 三氯醋酸溶液

0. 5ml，第2、3 管⑴中各精密加人供试品溶液0. lm l ,置37T

水浴中，准确反应15分钟，立即于*管U )中精密加入供试

品溶液0.1m l,第2、3 管（《) 中各加人25% 三氣醋酸溶液

0.5ml,摇匀，分别作为空白反应液（t。）和反应液（i )。精密量

取h 、t 和对照品溶液各0. 5ml,置试管中，各加水7. 0ml与碘

化汞钾溶液(取碘化gong23g、碘化钾16g,加水至100ml,临用前

与20%氢氧化钠溶液等体积混合）1. 0ml,混匀，另取试管一

支，加水7. 5ml与碘化gong钾溶液1. 0ml作为空白对照管，室温

放置15分钟，照紫外可见分光光度计法（通则0401)，在450nra

的波长处分别测定fo吸光度A。、t 吸光度A ,和对照品溶液吸

光度As,以A ,的平均值，按下式计算：

效价（单双形「（早位仅//mmgg)) = (戌 —AAS°X)X称5样X量稀（释mg倍) 紀 ^

式中5 为反应常数；

F 为对照品溶液浓度的校正值。

效价单位定义：在上述条件下，一个门冬酰胺酶单位相当

于每分钟分解门冬酰胺产生Ipmol氨所需的酶量。

蛋白质含量取本品约20mg，精密称定，照蛋白质含量

测定法（通则0731*法）测定，即得。

比活由测得的效价和蛋白质含量计算每lm g蛋白中

含门冬酰胺酶活力的单位数。