3 1 1 2乙酰色氨酸测定法

本法系用紫外-可见分光光度法（吸收系数法）测定人血

. 230 .

白蛋白供试品中的N -乙酰-DL-色氨酸含量。

测定法用生理氯化钠溶液将供试品蛋白质稀释至

5 % ,即为供试品溶液。量取供试品溶液0.1ml，分别加入

生理氯化钠溶液0. 3m l和0. 3m o l/L髙氣酸溶液3. 6ml, 混

匀；另取生理氣化钠溶液0 .4 m l,加0_3mo l / L 高氣酸溶液

3 .6 m l,混匀，作为空白对照。室温放置10分钟，以每分钟

3500转离心2 0分钟，取上清液在波长280nm处测定吸光

度，用空白溶液调零点。按下式计算供试品中的iV-乙酰-

DL-色氨酸含量：

供试品N -乙酰-DL-色氨酸含量—（A Z8。X n)/5 . 25

(mmol/g) P

式中n 为供试品的稀释系数；

5. 2 5为N -乙酰-DL-色氨酸的毫摩尔吸收系数；

P 为供试品的蛋白质含量，g /L。

3 1 1 3苯酚测定法

本法系依据溴酸盐溶液与盐酸反应产生溴，遇苯酚生成

三溴苯酚，过量的溴与碘化钾反应释出碘，析出的碘用硫代

硫酸钠滴定液滴定，根据硫代硫酸钠滴定液的消耗量，可计

算出供试品中苯酚的含量。

测定法精密量取供试品lm l ,置具塞锥形瓶中，加水

50ml, 精密加人0 .0 2m o l/L溴溶液（称取溴酸钾0.56g, 加

溴化钾3g，加水溶解并稀释至1000ml)15~25ml(供试品含

苯酚量0. 3%.0. 5%时加25ml，小于0. 3%则加15ml) , 沿

瓶壁加人6mol/L盐酸溶液1 0m l,摇匀，密塞，在暗处放置

30分钟后，加25%碘化钾溶液2ml于具塞锥形瓶颈口，稍启

瓶塞，使流下，密塞，摇匀。以少量水洗瓶颈，用硫代硫酸

钠滴定液（0.02mol/L)滴定至近终点时，加淀粉指示液约

0.5ml，滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。

按下式计算：

^ 量（；（）—（％ —% )X ^ X 15’ 69X100

式中V。为空白试验消耗硫代硫酸钠滴定液的体积，ml;

V ,为供试品消耗硫代硫酸钠滴定液的体积，ml;

c 为硫代硫酸钠滴定液的浓度，mol/L;

15. 6 9为苯酚分子量的1 /6。

【附注】（1)硫代硫酸钠滴定液（0. lm o l/L ) 的制备及标

定称取硫代硫酸钠26g与无水碳酸钠0.20g, 加新沸过的

冷水适量溶解并稀释至1 0 0 0m l,摇匀，放置1个月后滤过。

取在12CTC干燥至恒重的基准重铬酸钾0. 1 5 g ,精密称定，

置碘瓶中，加水50ml溶解，加碘化钾2.0g, 轻轻振摇使溶

解，加稀硫酸（5. 7 - 1 0 0 ) 4 0 m l,摇匀，密塞；在暗处放置

10分钟后，加水250ml稀释，用本液滴定至近终点时，加

淀粉指示液(称取可溶性淀粉0.5g，加水5m l混悬后缓缓倾

人100ml沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，冷却，倾

取上层清液。本液应临用配制）3ml, 继续滴定至蓝色消失

而显亮绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每lm l硫代

硫酸钠滴定液（0. lm o l/L )相当于4. 903mg重铬酸钾。根据

本液的消耗量与重铬酸钾的取用量，算出本液的浓度，

即得。

(2 )硫代硫酸钠滴定液（0.02mol/L) 的制备精密量取

硫代硫酸钠滴定液（0. lm o l/L ) 100ml, 加水准确稀释至

5 0 0m l,摇匀。

(3 )可做限度测定。