紫外可见分光光度计的校准主要是通过对一些有数值型的技术指标测试来进行。如波长准确度、波长重复性、光谱带宽、杂散光、分辨率、透射比误差、透射比重复性、噪声、基线平直性等，这里主要介绍波长准确度和波长重复佳、透射比准确度和透射比重复性两个项目校准的具体仪器条件或校准步骤。

　　①波长准确度和波长重复性  若仪器能够放置低压汞灯的，按照检定规程低压汞灯进行全波长测试，否则可用仪器固有的氘灼测试，取单束光能量方式，扫描速度15nm/min，响应快，zui小带宽0.1nm，量程0～100%，对486. 02nm和656. 10nm两个单峰进行单方向重复扫描3次，测量出谱图上的2条谱线波长，波长测量的平均值与波长的标准值之差就是波长准确度，测量波长的zui大值与zui小值之差就是波长重复性。

　　②透射比准确度和透射比重复性  取带宽2nm，用1套标准石英吸收池分别装空白溶液和质量分数为0．006000%的重铬酸钾标准溶液，在35nm，257nm,313nm，350nm四个波长处连续3次测量透射比，与检定规程中附带的标准值进行比较，测量平均值与标准值之差就是透射比准确度，测量值的zui大值与zui小值之差就是透射比重复性。