探讨葎草中总黄酮含量的测定方法。方法: 以芦丁为对照品，采用超声提取法提取总黄酮，用亚硝酸钠-氯化铝-氢氧化钠显色法，显色条件: 亚硝酸钠质量浓度 5%、氯化铝质量浓度 10%、氢氧化钠质量浓度 4%。通过紫外可见分光光度计测定律草中总黄酮的含量。结果: 检测波长为 510 nm，芦丁在浓度 0． 024 1 ～0． 064 0 g·L－1 范围内呈良好的线性关系，回归方程: y =0. 081 7x －0． 001 8( R 2 =0． 999 5) ，1 h 内基本稳定( RSD =0． 364%) ，重复性较好( RSD =0． 600 %) ，加样回收率为 99． 46%( RSD =1． 685%) 。葎草［Humulus scandends(lour． )Merr．］又名拉拉秧、拉拉藤等，为桑科植物的全草 ［1］ ，分布在我国东北、华北、中南、西南等地区。另外在亚洲、北美、非洲等地区也均有分布 ［2］ 。在研究葎草提取物的抗菌作用时发现 ［3］ ，其水提取液对革兰阳性菌具有较强的抗菌活性，并证实抗菌作用与葎草中所含的黄酮类成分有关。本研究通过采用超声提取法提取葎草中的总黄酮，以芦丁为对照品，以亚硝酸钠-氯化铝-氢氧化钠为显色剂，建立紫外可见分光光度法测定葎草中总黄酮含量的方法，从而为合理利用葎草提供科学依据。

1 仪器与材料
752N-紫外可见分光光度计;SK8200HPULTRASONICINSTRUMENT(上海科导超声仪器有限公司);AX200 万分之一电子天平(SHMADZU COR-PORATION JAPAN)。芦丁准品(由中国生物制品检定所鉴定);葎草(10 月采摘于牡丹江市北山);亚硝酸钠、三氯化铝、氢氧化钠和乙
醇等(所用试剂均为分析纯)。
2 方法与结果
2． 1 芦丁对照品溶液的制备
精密称取经干燥至恒质量的芦丁标准品 20 mg，置于 100mL 容量瓶中，加80%乙醇至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
2． 2 葎草供试品溶液的制备
取葎草样品放入研钵中粉碎过筛(40 目)，精密称取约 1g 并置于索氏提取器中，加石油醚 100 mL，回流加热，至提取液无色，弃去石油醚提取液。待药渣挥散干后，干燥至恒质量，转移到平底烧瓶中，加 80%乙醇50 mL 密塞称质量，超声提取 0． 5 h，加活性炭脱色，过滤，取滤液。连续提取 5 次，合并各分滤液。
2． 3 测定波长的选择取芦丁对照品溶液 5 mL 置于 25 mL 容量瓶中并加入5%亚硝酸钠溶液 1mL 摇匀，放置 6 min，加 10% 氯化铝溶液1 mL 摇匀，放置 6 min，再加 4%氢氧化钠溶液 8 mL 摇匀，然后用 80%乙醇定容至刻度线，摇匀，放置 10 min。同时配制未加对照品只加入显色剂的溶液作为空白对照溶液。在 440nm ～560 nm 波长范围内扫描吸收曲线 ［4］ 。结果表明在 510nm 处有大吸光度。
2． 4 显色剂条件的选择
2． 4． 1 亚硝酸钠浓度的选择 精密量取 5 份 2． 1 项下芦丁对照品溶液 4 mL 置于 25 mL 容量瓶中，分别加入 1%、3%、5%、7%、9%浓度的亚硝酸钠溶液 1 mL，摇匀，放置6 min，再加入 10%氯化铝溶液 1 mL，摇匀，静置 6 min，再加入 4% 氢氧化钠溶液 8 mL，然后用 80% 乙醇定容至刻度线，摇匀，放置 10 min。亚硝酸钠浓度在 5%，有大吸收。在 510 nm 处测得吸光度值，见表 1。
2． 4． 2 氯化铝浓度的选择 精密量取 5 份 2． 1 项下芦丁对照品溶液4 mL 置于25 mL 容量瓶中，分别5%亚硝酸钠溶液1 mL，摇匀，放置 6 min，再分别加入 8%、9%、10%、11%、12%的氯化铝溶液 1 mL，摇匀，放置 6 min，再加入 4% 氢氧化钠溶液 8 mL，然后用 80% 乙醇定容至刻度线，摇匀，放置10 min。氯化铝浓度在 10%，有大吸收。在 510 nm 处测定吸光度值，见表 1。

2． 4． 3 氢氧化钠浓度的选择 精密量取 5 份 2． 1 项下芦丁对照品溶液4 mL 置于25 mL 容量瓶中，分别5%亚硝酸钠溶液 1 mL，摇匀，放置 6 min，加入 10% 氯化铝溶液 1 m，摇匀，放置 6 min，分别加入 2%、3%、4%、5%、6%的氢氧化钠溶液8 mL，然后用80%乙醇定容至刻度线，摇匀，放置10 min。氢氧化钠浓度在 4%，有大吸收;在 510 nm 处测定吸光度值，见表 1。
2． 5 标准曲线的绘制

精密量取芦丁对照品溶液 0． 0 mL，3． 0 mL，4． 0 mL，5． 0mL，6． 0 mL，7． 0 mL，8． 0 mL 分别置于 25 mL 容量瓶，按 2． 3项下方法操作。在 510 nm 波长处测定吸光度，以吸光度 A为纵坐标，浓度 C 为横坐标绘制标准工作曲线，得回归方程:Y =0． 081 7 X －0． 001 8，相关系数:R 2 =0． 999 5。线性范围0． 024 ～0. 064 g·L－1 ，见图 1。芦丁对照品在 510 nm 波长处吸光度标准曲线

2． 6 稳定性实验

按 2． 3 项下方法配制 6 份芦丁对照品溶液，显色后，放

置 10 min、20 min、30 min、40 min，、50min、60 min 在 510 nm波长处分别测定吸光度值，见表 2。

2． 8 加样回收率实验
精密称取约 20 mg 研细过筛的葎草样品 5 份，按 2． 2 项下方法配制，分别置于 25 mL 容量瓶中，分别加入 0． 5 mL、1. 0 mL、1． 5 mL、2． 0 mL、2． 5 mL 的对照品溶液，按 2． 3 项下
方法。在 510 nm 波长处测定吸光度值，见表 4。
2． 9 样品含量的测定
取葎草 3 份，按 2． 2 项下方法配制，按 2． 3 项下方法操作，在 510 nm 波长处测定吸光度值。

2． 10 提净实验
分别取 2． 8 中 3 份提取黄酮后的葎草残渣，再按 2． 2 项下方法提取 1 次，按 2． 3 项下方法操作。测吸光度值平均值为 0． 000 01，表明用 50 mL 80%乙醇超声提取 5 次葎草中的总黄酮已基本提净。

草、益母草、炮附子、党参与生地黄，在月经期后使用乌鸡白凤丸，该疗法的有效率约 75% ［11］ ;③将治疗划分为行经期与经间期。在经间期进行益气养阴，选取知母、墨旱莲、白术、党参、黄芪、生地黄、女贞子、白芍 8 味药材，在行经期另外添加 5 味药材:乌贼骨、生蒲黄、椿白皮、茜草与地榆炭;④人为地把治疗周期分为卵泡期、排卵期、黄体期与月经期。特别需要注意的是，在后一个时段，即月经期，需注意药材选择，进行区别用药。

3 中西医结合治疗
中西医结合是当今医疗界的潮流与发展趋势，中医固本，西医检查手段先进，两者的结合能够进一步提高治疗效果。目前，在中西结合治疗崩漏方面，有不同观点。王锦华等［11］ 选取甘草、党参、海螵蛸、三七、茜草、地榆炭、艾叶、当归、黄芪、白芍、补骨脂这些中药材，在西医方面借助雌孕激素序贯疗法、抗贫血治疗、诊断性刮宫、宫缩剂、止血剂，对崩漏患者进行治疗，有效率约 97． 0%;肖静等
 取八珍汤加味
与安宫黄体、乙烯雌酚这两类西药，综合治疗崩漏。经期第 5 天使用中药方，在 5 ～22 d 使用安宫黄体 10 mg，每日1 次，22 ～27 d 使用乙烯雌酚，每日 1 次。
综上所述，中药治疗功能性子宫出血的临床，主要包括中医辨证施治，中药周期疗法，中西结合治疗等。