:拟建立紫外分光光度计法测定氨基寡糖素水剂中有效成分氨基寡糖素的分析方法。根据农药的性质，氨基寡糖素可以水解 成氨基单糖( D －葡萄糖胺) ，D －葡萄糖胺在碱性条件下与乙酰丙酮形成生色原，生色原在酸性反应液中与对二甲氨基苯反 应形成红色物质，用紫外分光光度计在560nm 处测定其吸光度。氨基寡糖素在 0． 033 ～ 0． 528 mg/mL 范围内，浓度与吸光度呈良 好的线性关系，该方法标准偏差0． 0001。该方法具有良好的精密度和准确度，操作简单易行、重现性好。

氨基寡糖素( Amino Oligosaccharins) ，也称为农业壳 寡糖，其中文别名为壳寡糖低聚 － D 氨基葡萄糖，是根据植 物的生长需要，采用*的生物技术生产而成，分为固态和 液态两种类型。壳寡糖本身含有丰富的 C、 N，可被微生物分 解利用并作为植物生长的养份。 自20 世纪60 年代以来，壳寡糖作为植物免疫激活因子 越来越受到人们的重视。壳寡糖对植物影响主要是诱导抗 性，促使植物 POD、SOD、PAL 活性大大提高，又促进植物合 成植保素，激发植物木质素的合成和积累，提高作物抗病性， 同时又促进植物生长。氨基寡糖素是从海洋生物外壳提取 而来的安全、无毒、无残留的多糖类天然产物，经酶解产生聚 合度为2 ～15 的寡聚糖，是一种新型的生物农药，对病毒、真 菌和细菌等等病原引起病害的防治均有一定的作用，并对病 原菌的生长有一定的抑制作用。国内研究者发现氨基寡糖 对苹果花叶病、西瓜病毒病、枯萎病、辣椒疫病等多种病害均 有较好的防治。另外，氨基寡糖素还具有提高作物产量，促 进作物生长的作用。综上所述，作为新型的生物农药，氨基 寡糖素的生产工艺简单，应用前景广阔，但由于其组分并不 单一，产品质量控制较为复杂，尚未发现用于农药制剂中质 量分数的测定方法，本篇文章拟参考氨基糖的特性反应原理建立2%氨基寡糖素水剂中有效成分氨基寡糖素的检测分析 方法。 1 实验部分 1． 1 氨基寡糖素理化性质 氨基寡糖素分子式为( C6H11O4N) n( n≥2) ，其相对分子 质量约为 322 ～ 100000，熔点为 190 ～ 194℃，沸点为 102℃， 蒸气压( 20℃) 为 2330Pa，20℃时在水中的溶解度为332． 22 g/L，常温下稳定。

1． 2 检测方法 氨基寡糖素用浓盐酸水解成单糖( D － 葡萄糖胺) 后， D －葡萄糖胺在碱性条件下与乙酰丙酮形成生色原，生色原在 酸性反应液中与对二甲氨基苯反应形成红色物质，以氨 基寡糖素标准品为对照，用分光光度计测定并计算氨基寡糖素的质量分数。 1． 3 实验试剂和溶液 氨基寡糖素标准品:已知准确质量分数≥99． 0%; 无水乙醇( 分析纯) ; 醋酸( 分析纯) ; 氢氧化钠溶液:400g/L; 显色液; 乙酰丙酮( 分析纯) ; E 液:取1 mL 乙酰丙酮于24 mL 碳酸钠溶液中( 用前配 置) ; 对二甲氨基溶液( 分析纯) ; P 液:称取0． 8 g 对二甲氨基溶液于30 mL 乙醇 浓盐酸( 1 +1) 溶液中( 用前配置) 。 1． 4 UV1901PC双光束紫外可见分光光度计 ;电子天平。 1． 5 实验步骤 1． 5． 1 氨基寡糖素标样溶液的水解及吸光度测定 称取适量氨基寡糖素标样，置于含 30 mL 浓醋酸的圆底 烧瓶中，加热回流水解 3 h，然后用氢氧化钠溶液中和至 pH 值为7． 0，转移至100 mL 容量瓶中，加水定容至刻度，即为标 准氨基寡糖素水解定容液，取 1 mL 标准氨基寡糖素水解定 容液加入 100 mL 容量瓶中，加入 4 mL 水，再加入 1 mL E 液，于沸水浴中放置25min，至冰水浴中( 20℃ ～25℃) 1 h，作 三次重复，测定吸光度为 A1。 1． 5． 2 试样溶液的水解与吸光度的测定 称取含0． 05 g 氨基寡糖素试样，置于含30 mL 浓醋酸的 水解装置中，回馏水解 3 h，然后用氢氧化钠中和 pH 值至 7． 0，转移至100 mL 容量瓶中，用水定容至刻度，即为试样水 解溶液。取1 mL 氨基寡糖素试样水解定容液，加入 4 mL 水，再加入1 mL E 液，于沸水浴中放置25min，至冰浴中冷却，然后加入 3 mL 无水乙醇，再加入 1 mL P 液，摇匀后 放置( 20 ～25℃) 1 h，作三次重复，测得样品水解定容液的吸 光度为 A2。 同时按照标样溶液与试样溶液的处理方法，作空白实 验，在相同的条件下，未见有吸收，即此方法整个过程中未有 杂质干扰。 1． 5． 3 试样质量分数计算 试样中氨基寡糖素的质量分数 X1 按公式( 1) 计算:
X1 =
A2·m1·P A1·m2
( 1)
式中: A1 －氨基寡糖素标样的吸光度; A2 －氨基寡糖素试样的吸光度; m1 －氨基寡糖素标样的质量， g; m2 －氨基寡糖素试样的质量， g; P －标样中氨基寡糖素的质量分数， %。 2 实验结果与讨论 2． 1 水解过程酸的选择 此实验过程中分别选用了浓盐酸、浓醋酸和稀硫酸来对 氨基寡糖素进行水解，但是通过实验发现，相同的质量的氨 基寡糖素标样，用浓醋酸的一组，其在 560 nm 的条件下，吸 光度大，即水解*的溶剂是浓醋酸，稀硫酸一组，吸光 度小，由于浓硫酸具有强烈的腐蚀性，即未考虑。所以 后选择用浓醋酸作为水解试剂。 2． 2 调节 pH 值过程碱液的选择 此过程由于水解完毕，酸的量是极其过量的，因此，要调 至中性，所以选用了浓度比较高的强碱溶液氢氧化钠溶液。 2． 3 线性关系实验 分别移取方法1． 5． 1 中 0、0． 5、 1、 2、 4、6 mL 标准氨基寡 糖素水解定容液，进行处理，测得吸光度值与浓度的关系。

3 结论 综上所述，上述紫外分光光度计外标法是可行、准确、有 效且重现性好的氨基寡糖素测定方法，可以作为氨基寡糖素质量分数检测的分析方法。