操作步骤
1.1 打开 721 型分光光度计电源开关和比色皿室的箱盖，使光电管在无光照情况下预热 20 min。
1.2 旋转波长调节器，选择 450 nm 为测定所需的单色光波长。
1.3 选择适当的灵敏度，一般先将灵敏度旋钮旋至低档位。
1.4 调 0%：打开比色皿室的箱盖（关闭光门），用零点调节器调节旋钮使电表指针在通光度（T 值）
为 0%处。1.5 调 100%：在比色皿中加入猪精液稀释剂溶液 4 mL，拉动拉杆使其置于光路中，盖上比色皿室箱盖（打开光门），调节光量调节旋钮，使电表指针在 T 值为 100%处。

1.6 反复调节旋钮，直到关闭光门和打开光门时指针分别指在 T 值为 0%和 100%处为止。

如果 T 值不能调节到 100%，就增大灵敏度，重新调 0%、100%。

1.7 待测溶液的配制：取比色皿一支（以容量为4 mL 比色皿为例），分别加入 3.6 mL 猪精液稀释剂溶液，0.4 mL 猪原精液混匀，用擦镜纸擦干比色皿透光面，使其光亮，无气泡。1.8 将待测溶液置于比色皿并放入比色皿室中，盖上箱盖，拉动拉杆将待测溶液置于光路中，此时从指针的位置读得待测溶液的 T 值或吸光率（A 值）。T 值或吸光率（A 值）根据对照表读取精液密度。

2 操作技巧
2.1 使用比色皿时，只能拿毛玻璃的两面，并且必须用擦镜纸擦干透光面，以保护透光面不受损坏或产生斑痕。用比色皿装液前必须用所装溶液冲洗 3 次，避免改变溶液的浓度。
2.2 生猪精液取样时应取精液瓶中间的液样。
2.3 生猪精液长期放置会下沉到容器底部，因此，取样时应摇匀，测量时速度要快，读数要准。

3 计算方法

利用分光光度计测出 T 值后，根据对照表读取精液密度（ρ），用于计算稀释液的加入量和确定分装瓶数，计算公式如下：
Y=ρ×V×m×（1-n）÷35（亿/瓶）

V1=Y×80（mL）

V2=V1-V0

注：ρ 为精液密度，V 为猪精液体积，m 为精子活力，n 为精子畸形率，Y 为瓶数，V0 为采精量，V1 为猪精液稀释后的体积，V2 为加入稀释液的体积。按照国家标准 GB/T 25172-2010，精液产品中总精液数为 30~35 亿个/瓶，每剂 80 mL。实际生产过程中，精子畸形率通过普通显微镜难以检测，因此，精子畸形率=0%，稀释后精子活力与之前保持不变。