分光光度计是实验室、科研机构、医疗、农业、食品厂、饮用水厂等机构*检验设备。已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
分光光度计的显色反应一般要求影响显色反应因素选择性好、灵敏度高,生成的有色化合物性质稳定,显色剂与有色物颜色反差大,显色反应要易于控制显色剂用量、反应液的酸碱度(pH)、反应温度、显色反应时间干扰离子的影响。
1、分光光度计的显色反应一般要求:
(1)选择性好:显色剂较好只与一种被测组分起显色反应;
(2)灵敏度高:灵敏度高有笪微量组分的测定;
(3)有色化合物性质稳定:确保前后测定准确.
(4)显色剂与有色物颜色反差大:两者较大吸收波长之差应大于60nm;
(5)显色反应要易于控制:结果的确保实验再现性.
2、影响分光光度计显色反应的主要因素:
(1)显色剂用量:通过实验来确定较适用量;
(2)反应液的酸碱度(pH):溶液酸碱度直接影响金属离子与显色剂存在形式以及有色化合物组成的稳定性.
(3)反应温度:不同的显色反应需要不同的反应温度,一般显色反应可在室温下完成.
(4)显色反应时间:显色反应的速度有快有慢.
(5)干扰离子的影响:应采用适当方法消除其影响。